說明:Dual-Luciferase? Reporter (DLRTM) Assay System (Dual-Luciferase? 雙螢光素酶報告基因檢測系統) 為雙報告基因檢測提供有效的手段。 在DLRTM 檢測中,螢火蟲(Photinus pyralis ) 螢光素酶和海腎(Renilla reniformis ) 螢光素酶的活性可在單個樣品中依次檢測。首先檢測螢火蟲螢光素酶,將螢光素酶檢測試劑II(Luciferase Assay Reagent II, LAR II)加入樣品中,產生的光信號至少持續1分鐘。定量螢火蟲螢光強度后,再在同一個樣品中加入Stop & Glo? 試劑,
將上述反應終止,同時啟動海腎螢光素酶反應。使用帶有試劑自動注射器的發光檢測儀,可在4 秒內完成兩個檢測。在DLRTM 檢測系統中,兩個報告基因產生的線性檢測的靈敏度均可達埃摩爾級(<10-18),在實驗宿主細胞內均無內源活性。而且,DLRTM 檢測的一體化模式既可快速定量檢測轉染細胞,也可用于快速定量檢測無細胞轉錄/ 翻譯反應體系中的兩個報告基因。
Promega 推薦使用針對DLRTM 檢測系統進行過確證的發光檢測儀,這些發光檢測儀均帶有DLReady TM 標識。pGL4 螢光素酶報告基因載體是針對DLRTM 檢測系統而設計。組成型表達的海腎螢光素酶載體可與任何實驗用螢火蟲螢光素酶載體聯合共轉染哺乳動物細胞。
Cat.# E1960 和E1980 產品請注意:系統中已提供了足夠的Passive Lysis Buffer,能夠進行96 孔板細胞的1,000 次檢測( 一般每孔用20μl 1X PLB)。若需要更多的Passive Lysis Buffer( 如>100μl/ 孔),可單獨購買。
特點
? 準確性更高:使用海腎螢光素酶做內對照可得到更精確的結果。
? 方便:無需分開樣品,可節省平板和時間。
? 靈敏:可用于研究弱啟動子,低水平表達/ 調控和轉染不佳的細
胞的表達。
? 線性范圍:線性范圍超過7 個數量級;活性很高的樣品一般無需
稀釋。
儲存條件:儲存于-20℃。
商品貨號 | 產品名稱 | CAS# | 包裝規格(單位) | 產品價格 | 操作 |
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